تمایز سلولهای مشتق از مجرای پانکراس انسان به سلول های β- پس از تکثیر آزمایشگاهی

تاریخ انتشار: پنجشنبه 13 آذر 1393 | امتیاز: Article Rating

درمان جایگزین سلول های  β- عرصه امیدوار کننده ای از تحقیقات است که در حال حاضر منابع جدیدی از سلول ها را  برای استفاده بالینی مورد ارزیابی قرار می دهد. سلولهای اپیتلیال پانکراس کاندیدهای توانمندی برای مهندسی سلول β-  هستند، اما تکثیرآنها درمقیاس بزرگ هنوز نشان داده نشده است. در اینجا ما تکثیر و تمایز کارآمد سلولهای خالص شده ازمجرای پانکراس انسان (DCS) را به سلول های β- توصیف می کنیم. سلول های خالص شده CA19-9+ هنگامی که در محیط رشد سلول های اندوتلیالی کشت داده می شوند، بطور گسترده تکثیر یافته و طی 9 پاساژ 22  باردو برابر می شوند. در حالی که سلول های مشتق ازمجرای پانکراس انسان (HDDCs)تکثیرمی شوند، بیان مارکرهای سلول های مجرا در آنها  کاهش می یابد، اما بیان کم ژن  SOX9و CK19 را حفظ می کنند.  HDDCs ویژگی های مزانشیمی را به دست می آورند که با فیبروبلاست ها یا سلول های استرومایی پانکراس متفاوت است. بیان همزمان مارکرهای مجرایی و مزانشیمی پیشنهاد می کند که HDDCs از مجرای پانکراس از طریق یک انتقال نسبی اپیتلیال به مزانشیم (EMT)  مشتق می شوند. این فرضیه با مهار ظهور HDDC در کشت سلولی CA19-9 +  بعد از انکوباسیون با مهار کننده انتقال اپیتلیال به مزانشیم  A83-01 حمایت می شود. پس از یک پروتکل تمایزی تقلید کننده تکوین پانکراس، جمعیت های HDDC شامل حدود 2٪ از سلول های نابالغ تولید کننده انسولین بوده و انسولین غیرحساس به گلوکز را ترشح می کنند. مهار فنوتیپ مزانشیمی پروفایل بیان ژن سلول  β- را درسلول های HDDCs  تمایزیافته بدون اثر بر بیان و ترشح پروتئین انسولین بهبود می بخشد. ما نشان می دهیم که مجاری پانکراس ارائه کننده یک منبع جدید برای مهندسی مقادیر زیادی از سلول های شبه  - β با پتانسیل درمان دیابت هستند. 

Cell Reprogram. 2014 Dec;16(6):456-466.

β-Cell Differentiation of Human Pancreatic Duct-Derived Cells After In Vitro Expansion.

Corritore E1Dugnani EPasquale VMisawa RWitkowski PPiemonti LSokal EMLysy PA.

 

Abstract

Abstract β-Cell replacement therapy is a promising field of research that is currently evaluating new sources of cells for clinical use. Pancreatic epithelial cells are potent candidates for β-cell engineering, but their large-scale expansion has not been evidenced yet. Here we describe the efficient expansion and β-cell differentiation of purified human pancreatic duct cells (DCs). When cultured in endothelial growth-promoting media, purified CA19-9+ cells proliferated extensively and achieved up to 22 population doublings over nine passages. While proliferating, human pancreatic duct-derived cells (HDDCs) downregulated most DC markers, but they retained low CK19 and SOX9 gene expression. HDDCs acquired mesenchymal features but differed from fibroblasts or pancreatic stromal cells. Coexpression of duct and mesenchymal markers suggested that HDDCs were derived from DCs via a partial epithelial-to-mesenchymal transition (EMT). This was supported by the blockade of HDDC appearance in CA19-9+ cell cultures after incubation with the EMT inhibitor A83-01. After a differentiation protocol mimicking pancreatic development, HDDC populations contained about 2% of immature insulin-producing cells and showed glucose-unresponsive insulin secretion. Downregulation of the mesenchymal phenotype improved β-cell gene expression profile of differentiated HDDCs without affecting insulin protein expression and secretion. We show that pancreatic ducts represent a new source for engineering large amounts of β-like-cells with potential for treating diabetes.

PMID: 25437872
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان