سلول های بنیادی استرومایی قرنیه انسان از کشت سلول های اپیتلیال لیمبوس بر روی معادل های بافت RAFT پشتیبانی می کند

تاریخ انتشار: شنبه 16 آبان 1394 | امتیاز: Article Rating

سلول های اپیتلیال لیمبوس انسان (HLE)  و سلول های بنیادی استرومایی قرنیه (CSSC) در مجاورت نزدیک در نیچ سلول های بنیادی لیمبوس قرنیه در داخل بدن قرار دارند. با این حال،  HLE  معمولا در شرایط in vitro بدون حمایت سلول های نیچ کشت می شوند. در اینجا، ما مجاورت سلول به سلول محیط طبیعی را در شرایط آزمایشگاهی، برای فراهم کردن ابزاری برای بررسی فعل و انفعالات سلول های اپیتلیال-استرومایی و بهینه سازی شرایط کشت HLE  برای کاربردهای درمانی بالقوه مجددا ایجاد کردیم. از معادل های بافتی(TES)  RAFT (معماری طبیعی برای بافت سه بعدی) به عنوان یک بستر سه بعدی برای هم کشتی CSSC و HLE استفاده شد. نتایج ما نشان می دهد که تک لایه ای از HLE  با حفظ بیان  p63α، ABCB5، CK8  و CK15 (نشانگرهای HLE ) بر روی سطح RAFT TES  طی 13 روز از کشت شکل گرفته است  CSSC . در مجاورت نزدیک به HLE باقی مانده و بیان مارکر های سلول های بنیادی مزانشیمی را حفظ کردند. این روش ساده زمان آماده سازی کوتاهی نزدیک به 15 روز با شروع لایه بندی HLE و مشاهده تمایز دارد. علاوه بر این، هم کشتی HLE با یکی دیگر از انواع سلول های نیچ (CSSC) به طور مستقیم بر روی RAFT TES   سبب حذف نیاز به سلول های فیدر حیوانی می شود. RAFT TES  ممکن است برای انتقال درمانی انواع متعدد سلول ها برای بازگرداندن نیچ لیمبوس به دنبال آسیب و یا بیماری سطح چشم در آینده مفید باشد.

 

Sci Rep. 2015 Nov 4;5:16186. doi: 10.1038/srep16186.

Human corneal stromal stem cells support limbal epithelial cells cultured on RAFT tissue equivalents.

Kureshi AK1Dziasko M1Funderburgh JL2Daniels JT1.

 

Abstract

Human limbal epithelial cells (HLE) and corneal stromal stem cells (CSSC) reside in close proximity in vivo in the corneal limbal stem cell niche. However, HLE are typically cultured in vitro without supporting niche cells. Here, we re-create the cell-cell juxtaposition of the native environment in vitro, to provide a tool for investigation of epithelial-stromal cell interactions and to optimize HLE culture conditions for potential therapeutic application. RAFT (Real Architecture For 3D Tissue) tissue equivalents (TEs) were used as a 3-dimensional substrate for co-culturing HLE and CSSC. Our results demonstrate that a monolayer of HLE that maintained expression of p63α, ABCB5, CK8 and CK15 (HLE markers), formed on the surface of RAFT TEs within 13 days of culture. CSSC remained in close proximity to HLE and maintained expression of mesenchymal stem cell markers. This simple technique has a short preparation time of only 15 days with the onset of HLE layering and differentiation observed. Furthermore, co-cultivation of HLE with another niche cell type (CSSC) directly on RAFT TEs eliminates the requirement for animal-derived feeder cells. RAFT TEs may be useful for future therapeutic delivery of multiple cell types to restore the limbal niche following ocular surface injury or disease.

PMID: 26531048
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان