نقش اتوفاژی در تکثیر سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان و تمایز به سلول های عصبی,

تاریخ انتشار: جمعه 27 آذر 1394 | امتیاز: Article Rating

هدف از پژوهش حاضر، بررسی نقش اتوفاژی در تکثیر ، آپوپتوز و تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت  (BMSC) به سلولهای عصبی بود. پس از تیمار با راپامایسین، 3 -متیل آدنین (3-MA) ​​و یا کلروکوین، چرخه سلولی، آپوپتوز، بیان انولاز مخصوص نورون (NSE) و شدت متوسط ​​فلورسانس(MFI)   Notch1در سلولهای BMSCs  باروش فلوسایتومتری مورد بررسی قرار گرفت. بیان پروتئین مرتبط با میکروتول 2 (MAP2)، Notch1  و Hes1 توسط وسترن بلات بررسی شد. نتایج نشان داد که پس از القای اتوفاژی با استفاده از راپامایسین، تکثیر سلولهای BMSCs مهار شد. علاوه براین، جمعیت فاز S به طور قابل توجهی در مقایسه با در گروه شاهد (P <0.05) کاهش یافت. همچنین، درصد سلول NSE مثبت و بیان MAP2 به طور قابل توجهی نسبت به گروه کنترل افزایش یافت (P <0.05).  شدت متوسط ​​فلورسانس     Notch1 نسبت به گروه شاهد  افزایش یافت(P <0.05). وقتی که اتوفاژی توسط -MA 3 و یا کلروکوین مهار شد، درصد سلولهای آپوپتوتیک و سلول NSE مثبت و همچنین بیان MAP2 در مقایسه با گروه کنترل کاهش قابل توجهی یافت(P <0.05) . علاوه بر این، وسترن بلات نشان داد که  Notch1 و Hes1  در گروه تحت تیمار با راپامایسین کاهش یافتند، در حالی که آنها توسط  –MA  3 و یا کلروکوین تحت تاثیر قرار نمی گیرند. مطالعه حاضر نشان داد که القای اتوفاژی در سلولهای BMSCs  سبب کاهش جمعیت فاز S  آنها، پیشبرد تمایز آنها به سلولهای نورونی و افزایش بیان  NSE  و  MAP2می شود. مکانیسم های زیر بنایی این فرایند ممکن است به تنظیم مهار القای اتوفاژی مسیر سیگنالینگ Notch1 مرتبط باشد.

 

Mol Med Rep. 2015 Dec 10. doi: 10.3892/mmr.2015.4673. [Epub ahead of print]

Role of autophagy on bone marrow mesenchymal stem‑cell proliferation and differentiation into neurons.

Li B1Duan P1Li C2Jing Y1Han X3Yan W2Xing Y1.

 

Abstract

The purpose of the present study was to investigate the role of autophagy on rat bone marrow mesenchymal stem cell (BMSC) proliferation, apoptosis and differentiation into neurons. After treatment with rapamycin, 3‑methyladenine (3‑MA) or chloroquine, the cell cycle, apoptosis, expression of neuron‑specific enolase (NSE) and the mean fluorescence intensity (MFI) of Notch1 in BMSCs were examined by flow cytometry. The expression of microtubule‑associated protein 2 (MAP2), Notch1 and Hes1 was investigated by western blot analysis. The results showed that after induction of autophagy using rapamycin, the proliferation of BMSCs was inhibited. Furthermore, the S‑phase population was significantly decreased compared to that in the control group (P<0.05). In addition, the percentage of NSE‑positive cells and the expression of MAP2 were significantly increased compared to those in the control group (P<0.05). The MFI of Notch1 was markedly upregulated compared to that in the control group (P<0.05). When autophagy was inhibited by 3‑MA or chloroquine, the percentage of apoptotic cells and NSE‑positive cells as well as the expression of MAP2 were markedly reduced compared to those in the control group (P<0.05). Furthermore, western blot analysis showed that Notch1 and Hes1 were decreased in the rapamycin‑treated group, while they were not affected by 3‑MA or chloroquine. The present study indicated that induction of autophagy in BMSCs decreased their S‑phase population, promoted their differentiation into neurons and promoted the expression of NSE and MAP2. The mechanisms underlying this process may be linked to the regulation of autophagy‑induced inhibition of the Notch1 signaling pathway.

PMID: 26676567
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان