بررسي تاثير کاهش بیان ITGA5 بر توانایی مهاجرت سلول های بنیادی پالپ دندان انسان

تاریخ انتشار: یکشنبه 25 بهمن 1394 | امتیاز: Article Rating

مقدمه:

 هدف این مطالعه بررسی نقش اینتگرین-α5  (ITGA5) در تنظیم توانایی مهاجرت سلول های بنیادی پالپ دندان انسان (hDPSCs) بود که ممکن است شواهد جدیدی را برای درک مکانیسم های ترمیم و بازسازی بافت پالپ دندان ارائه دهد.

مواد و روش ها:

سلول های بنیادی پالپ دندان انسان با روش هضم آنزيمی ازبافت پالپ دندان جداسازی شدند. مارکرهای سطحی سلول های بنیادی پالپ دندان انسان با استفاده از روش فلوسیتومتری شناسایی شد. سپس توانایی تشکیل کلنی و تمایزچند رده ای سلول های بنیادی پالپ دندان مورد بررسي قرار گرفتند. وکتور لنتی ویروس حامل shRNA اینتگرین- α5 ساخته شد و از  real- timePCR  برای بررسی اثر لنتی ویروس shRNA اینتگرین-α5  استفاده شد. سپس روش انتقال چاهک برای ارزیابی اثر مهار اینتگرین-α5  درتوانایی مهاجرت سلول های بنیادی پالپ دندان انجام شد.

 يافته ها:

نتايج نشان داد سلول های جدا شده از بافت پالپ دندان برای مارکرهای سلول های بنيادی مزانشيمی مثبت بودند. علاوه براین، این سلول ها دارای توانایی تشکیل کلنی و تمایز چند رده ای هستند. وکتور لنتی ویروس حامل  shRNA اینتگرین- α5نه تنها می تواند hDPSCs  را با راندمان بالا آلوده کند ، بلکه همچنین سبب کاهش معنی دارسطح بیان mRNA  اینتگرین-  (P-0.01) α5شد. روش انتقال چاهک  نشان داد که تعداد سلولهای مهاجرت کرده به چاهک های پایین تر بطورقابل توجهی در گروه shRNA اینتگرین - α5 در مقایسه با گروه فاقد  shRNA  کمتربود .(P = 016)

نتيجه گيري:

اینتگرین- α5نقش مهمی در حفظ و تنظیم توانایی عادی مهاجرت  سلول های بنیادی پالپ دندان انسان دارد.

Int J Clin Exp Pathol. 2015 Nov 1;8(11):14425-32. eCollection 2015.

Effect of ITGA5 down-regulation on the migration capacity of human dental pulp stem cells.

Xu S1Cui L2Ma D2Sun W3Wu B2.

 

Abstract

BACKGROUND:

The purpose of this study was to evaluate the role of integrin-α5 (ITGA5) in regulating the migration capacity of human dental pulpstem cells (hDPSCs), which might provide new evidence for understanding the repair and regeneration mechanisms of dental pulp tissues.

MATERIALS AND METHODS:

The enzyme digestion method was employed to isolate the hDPSCs from dental pulp tissues. The cell surface markers of hDPSCs were detected using flow cytometry analysis. Then the colony forming and multi-differentiation capacity of hDPSCs were evaluated. The lentivirus vector that carried the ITGA5 shRNA was constructed and real-time PCR was used to examine the effectiveness of ITGA5 shRNA lentivirus. Then transwell assay was performed to evaluate the impact of ITGA5 inhibition on the migration capability of hDPSCs.

RESULTS:

Our results showed that the cells we isolated from the dental pulps were positive for mesenchymal stem cells biomarkers. In addition, the cells possessed both colony forming capacity and multi-differentiation potential. ITGA5 shRNA lentivirus could not only infect hDPSCs with high efficiency, but also down-regulate the expression level of ITGA5 mRNA significantly (P<0.01). The transwell assay revealed the number of cells that migrated to the lower chamber was significantly less in the ITGA5 shRNA group compared with that in the scrambled shRNA group (P=0.016).

CONCLUSION:

ITGA5 plays an important role in maintaining and regulating the normal migration capacity of hDPSCs.

PMID: 26823759
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان