تنظیم افزایشی miR-132 تمایز استئوبلاستی UC-MSCها را کاهش می دهد

تاریخ انتشار: شنبه 25 فروردین 1397 | امتیاز: Article Rating

هدف:

 مسیر پیام رسانی  Wnt/β-cateninدر بیان تنظیم افزایشی فاکتور رونویسی خاص استئوبلاستی استریکس(osterix) نقش بازی می کند و تمایز استئوبلاستی را افزایش می دهد. نشان داده شده است که بالا رفتن سطح miR-132 با همراه اسکلروزه کنندگی همراه است. آنالیزهای بیوانفورماتیک جایگاه اتصال مکمل بین miR-132 و 3'-UTR بتا کتنین را نشان داده است. این مطالعه اثر miR-214 را در تنظیم بیان بتا کتنین و تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف(UC-MSCs) به استئوبلاست بررسی کرده است.

مواد و روش ها:

سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف برای تمایز به استئوبلاست القا شدند. بیان miR-132، بتا کتنین، استریکس و آلکالین فسفاتاز همراه با فعالیت آلکالین فسفاتازی در روزهای 0، 5، 10 و 15 تشخیص داده شد. ارتباط تنظیمی بین miR-132 و بتا کتنین بوسیله سنجش ژن گزارشگر لوسیفراز دوگانه ثابت شد. سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف به پنج گروه از جمله agomir-control، miR-132 agomir، pGPH1-NC، pGPH1-β-catenin و miR-132 agomir + pGPH1-β-catenin گروه تقسیم شدند. بین بتا کتنین، استریکس و  آلکالین فسفاتاز همراه با فعالیت آلکالین فسفاتاز بعد از القا برای 15 روز تست شد.

نتایج:

 در فرایند تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف به استئوبلاست ها؛ miR-132 تنظیم کاهشی داشت و این در حالی بود که بیان بتا-کتنین، استریکس و آلکالین فسفاتاز همراه با فعالیت آلکالین فسفاتازی در این فرایند تقویت شد. ترانسفکشن miR-132 agomir و/یا pGPH1-β-catenin بیان بتا کتنین را به طور قابل توجهی کاهش داد، فعالیت مسیر پیام رسانی Wnt/β-catenin را کاهش داد، سطح استریکس را کاهش داد، بیان و فعالیت آلکالین فسفاتاز را تضعیف کرد  و تمایز استئوبلاست ها از سلول های بنیادی مزانشیمی را کاهش داد.

جمع بندی:

زمانی که سطح miR-132 در فرایند تمایز UC-MSCs به استئوبلاست ها کاهش یافت، سطح بتا کتنین افزایش یافت. تنظیم افزایشی miR-132 تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف را از طریق سرکوب بیان بتا کتنین، کاهش مسیر پیام رسانی Wnt/β-catenin و کاهش سطح استریکس مهار می کند.

Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2018 Mar;22(6):1580-1587. doi: 10.26355/eurrev_201803_14562.

Upregulation of miR-132 attenuates osteoblast differentiation of UC-MSCs.

Xue ZL1, Meng YL, Ge JH.

Abstract

OBJECTIVE:

Wnt/β-catenin signaling pathway plays a role in upregulating expression of osteoblast (OB) specific transcriptional factor Osterix and promoting OB differentiation. It was shown that the elevation of the miR-132 level was associated with sclerotizing inhibition. Bioinformatics analysis revealed the complementary binding site between miR-132 and 3'-UTR of β-catenin. This study investigated the influence of miR-214 in regulating β-catenin expression and differentiation of umbilical cord mesenchymal stem cells (UC-MSCs) into OB.

MATERIALS AND METHODS:

UC-MSCs were induced to differentiate to OB. The expressions of miR-132, β-catenin, Osterix, and ALP, together with ALP activity were detected on day 0, 5, 10, and 15. The regulatory relationship between miR-132 and β-catenin was confirmed by dual luciferase reporter gene assay. UC-MSCs were divided into five groups, including agomir-control, miR-132 agomir, pGPH1-NC, pGPH1-β-catenin, and miR-132 agomir + pGPH1-β-catenin groups. β-catenin, Osterix, and ALP expressions, together with ALP activity were tested after induction for 15 days.

RESULTS:

MiR-132 was downregulated, while β-catenin Osterix and ALP expressions, together with ALP activity were enhanced in the process of UC-MSCs differentiating into OBs. MiR-132 agomir and/or pGPH1-β-catenin transfection significantly reduced β-catenin expression, downregulated Wnt/β-catenin signaling pathway activity, declined Osterix level, weakened ALP expression and activity, and attenuated OB differentiation of UC-MSCs.

CONCLUSIONS:

The level of β-catenin was enhanced, while the miR-132 level was decreased in the process of UC-MSCs differentiating into OBs. Upregulation of miR-132 inhibited the differentiation of UC-MSCs through suppressing β-catenin expression, attenuating Wnt/β-catenin signaling pathway activity, and downregulating Osterix level.

PMID: 29630099
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان