وزیکول های خارج سلولی آنزیم های مدل گلوکورونیداز را طی فریز کردن-خشک کرد(freeze-drying) محافظت می کند

تاریخ انتشار: پنجشنبه 15 شهریور 1397 | امتیاز: Article Rating

وزیکول های خارج سلولی(EVs) نانوذره های طبیعی هستند که نقش های مهمی را در ارتباطات بین سلولی بازی می کنند و در پیام رسانی های زیستی، بیماری زایی و درمان به طور فزاینده ای مورد مطالعه قرار گرفته اند. با این وجود، در مورد شرایط بهینه برای انتقال و ذخیره سازی آن ها و اثر بالقوه آن ها روی حفظ محموله های بارگیری شده در وزیکول های خارج سلولی، اطلاعات اندکی وجود دارد. ما اولین ارزیابی جامع ثبات مربوط به انواع مختلف و به طور گسترده در دسترس وزیکول های خارج سلولی طی شرایط متنوع ذخیره سازی شامل-80 °C ، 4 °C ،دمای اتاق و فریز کردن و خشک کردن(لیوفلیزه کردن) انجام دادیم. لیوفلیزه کردن وزیکول های خارج سلولی اجازه مدیریت آسان آن ها در دمای اتاق را می دهد و بنابراین بررسی گسترده تر آن ها را به شدت تقویت می کند. یک آنزیم مدل، بتا گلوکورونیداز به درون انواع مختلف وزیکول های خارج سلولی مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی، سلول های اندوتلیالی و سلول های سرطانی بارگیری شد. با استفاده از تقسیم بندی نامتقارن زمینه جریان-جریان ما ثابت کردیم که آنزیم مدل در واقع به طور با ثباتی درون وزیکول های خارج سلولی کپسوله شده است. زمانی که ما فعالیت آنزیمی را به عنوان یک نشانگر ثبات وزیکول های خارج سلولی ارزیابی کردیم و آن ها را با لیپوزوم ها مقایسه کردیم، ما نشان دادیک که وزیکول های خارج سلولی طی لیوفلیزه کردن به طور ذاتی با ثبات هستند که این امر با استفاده از حفاظت کننده انجمادی بیشتر تقویت می شود. یافته های ما دیدگاه های جدیدی را برای کشف لیوفلیزه کردن به عنوان یک روش ذخیره سازی جدید ارائه می کند  و ما یک پایه مهم برای استانداردسازی و کاربرد پیشرفته وزیکول های خارج سلولی در تحقیقات زیست پزشکی ایجاد کردیم.

Sci Rep. 2018 Aug 17;8(1):12377. doi: 10.1038/s41598-018-30786-y.

Extracellular vesicles protect glucuronidase model enzymes during freeze-drying.

Frank J1, Richter M1,2, de Rossi C3, Lehr CM3,2, Fuhrmann K1, Fuhrmann G4,5.

Abstract

Extracellular vesicles (EVs) are natural nanoparticles that play important roles in intercellular communication and are increasingly studied for biosignalling, pathogenesis and therapy. Nevertheless, little is known about optimal conditions for their transfer and storage, and the potential impact on preserving EV-loaded cargoes. We present the first comprehensive stability assessment of different widely available types of EVs during various storage conditions including -80 °C, 4 °C, room temperature, and freeze-drying (lyophilisation). Lyophilisation of EVs would allow easy handling at room temperature and thus significantly enhance their expanded investigation. A model enzyme, β-glucuronidase, was loaded into different types of EVs derived from mesenchymal stem cells, endothelial cells and cancer cells. Using asymmetric flow field-flow fractionation we proved that the model enzyme is indeed stably encapsulated into EVs. When assessing enzyme activity as indicator for EV stability, and in comparison to liposomes, we show that EVs are intrinsically stable during lyophilisation, an effect further enhanced by cryoprotectants. Our findings provide new insight for exploring lyophilisation as a novel storage modality and we create an important basis for standardised and advanced EV applications in biomedical research.

PMID: 30120298
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان