بازبرنامه ریزی موثر مبتنی بر RNAی فیبروبلاست های انسانی اولیه مرتبط با بیماری به سلول های بنیادی پرتوان القایی

تاریخ انتشار: جمعه 26 اردیبهشت 1399 | امتیاز: Article Rating

بازبرنامه ریزی یک سلول سوماتیک بیمار به سلول های بنیادی پرتوان القایی(iPSCs) امید زیادی را برای مدل سازی بیماری ها و تکوین درمان های سلولی اتولوگ ایجاد کرده است. با این حال، بازبرنامه ریزی مداوم سلول های انسانی اولیه به دلیل این که آن ها به میزان زیادی پیر شده، بیمار و یا در فراوانی کم هستند، چالش برانگیز است. در این جا، ما یک روش مبتنی بر RNA مدیفه شده بسیار موثر و مناسب بالین را برای بازبرنامه ریزی رده های فیبروبلاستی اولیه انسانی مرتبط با بیماری و سایر سلول های انسانی با بازبرنامه ریزی مشکل به iPSCs ارائه می دهیم. هم چنین ما بهینه سازی را توصیف می کنیم که می تواند برای بازبرنامه ریزی دائمی این سلول های با بازبرنامه ریزی مشکل استفاده شوند. با استفاده از پروتکل ارائه شده، رده های iPSCs بدون الحاق ویروسی می توانند با موفقیت از شمار کوچکی از فیبروبلاست های انسانی اولیه و ظرفو تقریبا 5 تا 7 هفت هفته تولید شوند.

Methods Mol Biol. 2020;2117:271-284. doi: 10.1007/978-1-0716-0301-7_17.

Efficient RNA-Based Reprogramming of Disease-Associated Primary Human Fibroblasts into Induced Pluripotent Stem Cells.

McGrath PS1,2McGarvey SS1,2Kogut I1,2Bilousova G3,4.

Abstract

Reprogramming a patient's somatic cells into induced pluripotent stem cells (iPSCs) holds great promise for disease modeling and the development of autologous cellular therapeutics. However, it remains challenging to consistently reprogram primary human cells, as they are frequently aged, diseased, or in low abundance. Here we present a modified highly efficient and clinically relevant RNA-based method for reprogramming disease-associated and other difficult-to-reprogram human primary fibroblast lines into iPSCs. We also describe optimizations that can be employed for consistent reprogramming of these difficult-to-reprogram cells. With the provided protocol, integration-free iPSC lines can be successfully generated from a small number of primary human fibroblasts in approximately 5-7 weeks.

PMID: 31960386
ثبت امتیاز
آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان