هموگلوبین زنوژنیک خارج سلولی توانایی تمایز میوژنیک میوبلاست C2C12 را مهار می کند

تاریخ انتشار: جمعه 12 دی 1399 | امتیاز: Article Rating
ویژگی های عملکردی سلول های ماهواره ای (SC) که به عنوان آغازگر میوژنز عمل می کنند و به عنوان یک هدف امیدوار کننده برای سلول درمانی بدل شده اند ، به ریز محیط آنها بستگی دارد. هدف از این مطالعه بررسی تأثیر هموگلوبین فاقد سلول ، به عنوان بخشی از ریز محیط سلولهای عصبی بر خصوصیات عملکردی آنها بود. رده سلولی C2C12 به عنوان مدل آزمایشی مدل تجربی سلول های ماهواره ای عمل می کند. هموگلوبین جدا شده از خون خوک (PHb) و گاو (BHb) کشتارشده به عنوان هموگلوبین خارج سلولی بکار می رود. میزان تکثیر سلولهای C2C12 با استفاده از آزمون MTT ، توانایی مهاجرت توسط روش خراش و ظرفیت تمایز میوژنیک توسط رنگ آمیزی هیستوشیمیایی و بیان ژنهای خاص رده میوژنیک با آنالیز RT-PCR ارزیابی شد. اثر هموگلوبین بر تکثیر و مهاجرت سلولهای C2C12 به غلظت آن و گونه های جانوری که از آن جدا شده بود بستگی داشت اما اثر BHb برجسته تر بود. هر دو PHb و BHb باعث کاهش میزان بیان میوژنین و کراتین کیناز مخصوص عضله در غلظت 10 میکرومولار شدند. در حالی که PHb هیچ تاثیری بر پارامترهای مورفوژنیک میوتول های C2C12 نداشت ، BHb سطح و طول میوتول های C2C12 کشت شده در 2٪ سرم اسب DMEM / و 10٪سرم گوساله DMEM / را تغییر داد. در حالی که PHb و BHb تاثیری در بیان هم اکسیژناز -1 (Hmox1) نداشتند ، آنها بیان فاکتور Hif1α را در غلظت 10 میکرومول تحریک کردند. اثر مهاری هموگلوبین فاقد سلول در تمایز میوژنیک نشان می دهد که این ماده می تواند یک عامل مهم در نتیجه سلول درمانی آسیب عضلانی باشد.

Extracellular xenogeneic hemoglobin suppresses the capacity for C2C12 myoblast myogenic differentiation

Abstract: Functional characteristics of satellite cells (SCs) that act as myogenesis initiators and have emerged as a promising target for cell therapy, are dependent on their microenvironment. The aim of this study was to investigate the effect of cell-free hemoglobin, as a part of the microenvironment of SCs, on their functional characteristics. The C2C12 cell line served as the experimental model of the SC experimental model; hemoglobin isolated from porcine (PHb) and bovine (BHb) slaughterhouse blood served as the extracellular hemoglobin. The proliferation rate of C2C12 cells was assessed by the MTT test, migration capacity by the scratch assay, and myogenic differentiation capacity by histochemical staining and RT-PCR analysis of the expression of genes specific for myogenic lineage. The effect of hemoglobin on the proliferation and migration of C2C12 cells was dependent on its concentration and the animal species it was isolated from, but the effect of BHb was more prominent. Both PHb and BHb decreased the expression levels of myogenin and muscle specific creatine kinase at a 10 µM concentration. While PHb had no effect on the morphometric parameters of C2C12 myotubes, BHb modified the area and length of C2C12 myotubes cultivated in DMEM/2% horse serum and DMEM/10% fetal calf serum. While PHb and BHb had no effect on heme oxygenase 1 (Hmox1) expression, they stimulated the expression of hypoxia-inducible factor 1-alpha (Hif1α) at a concentration of 10 µM. The mainly inhibitory effect of cell-free hemoglobin on myogenic differentiation suggests that it could be a relevant factor in the outcome of cell therapy of muscle injury.
PMID: 345677
ثبت امتیاز
آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان