Wnt3a سبب پیشبرد سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف انسان به سلولهای شبه اپیدرمی شود

تاریخ انتشار: ﺳﻪشنبه 14 بهمن 1393 | امتیاز: Article Rating

هدف:

سلول های بنیادی مزانشیمی جمعیت سلول های پرتوانی هستند که می توانند تحت شرایط خاصی به سلول های شبه اپیدرمی تمایز یابند. Wnt3a می تواند تکثیرو تمایز سلول های بنیادی را پیش ببرد. با این حال، نقش Wnt3a در تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف انسان (hUCMSCs) به سلولهای اپیدرمی ناشناخته است.

مواد و روش ها:

سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف درپاساژ سوم درمحیط طبیعی ، محیط شرطی سلول های بنیادی اپیدرمی و محیط شرطی حاوی  Wnt3aکشت شدند. پس از کشت به مدت 5 روز، بیان سیتوکراتین 19 (CK19)، آنتی ژن اختصاصی سلول های شبه اپیدرمی، توسط ایمونوفلورسانس و فلوسیتومتری مورد بررسی قرار گرفت. بیان mRNA ژن CK19 توسط واکنش رونویسی معکوس زنجیره پلیمراز(RT-PCR)  تایید شد و بیان بتا کاتنین توسط روش وسترن بلات نشان داده شد.

نتایج:

سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف هنگامی که در محیط شرطی کشت شدند، به سلولهای شبه اپیدرمی تمایز یافتند که با رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس مثبت برای  CK19نشان داده شد. نتایج فلوسیتومتری نشان داد که تعداد سلول های CK19 مثبت در گروه با محیط شرطی سلول های بنیادی اپیدرمی به طور قابل توجهی بالاتر از گروه شاهد ، اما کمتر از گروه حاوی  Wnt3aبود(P <0.05) . نتایجRT-PCR  نشان داد که سطح بیان mRNA ژن CK19 در گروه محیط شرطی به طور قابل توجهی کمتر از گروه Wnt3a بود (P <0.01) . نتایج وسترن بلات نشان داد که بیان بتا کاتنین در گروه با محیط شرطی به طور قابل توجهی کمتر از گروه Wnt3a بود(P <0.01) .

نتیجه گیری:

این نتایج نشان می دهد که Wnt3a به طور موثری می تواند سبب پیشبرد تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف به سلولهای شبه اپیدرمی شود.

Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015 Jan;19(1):86-91.

Wnt3a promotes human umbilical cord mesenchymal stem cells to differentiate into epidermal-like cells.

Sun TJ1Tao RHan YQXu GLiu JHan YF.

 

Abstract

OBJECTIVE:

Mesenchymal stem cells are a population of pluripotent cells that can differentiate into epidermal-like cells under certain conditions. Wnt3a can promote the proliferation and differentiation of stem cells. However, the role of Wnt3a in the differentiation of human umbilical cord mesenchymal  stem cells (hUCMSCs) into epidermal-like cells is unknown.

MATERIALS AND METHODS:

Third-generation hUCMSCs were cultured in normal medium, epidermal stem cell-conditioned medium, and conditioned medium with added Wnt3a. After culturing for 5 days, the expression of cytokeratin 19 (CK19), an antigen specific for epidermal-likecells, was assessed by immunofluorescence and flow cytometry. The expression of CK19 mRNA was confirmed by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), and β-catenin expression was detected by western blot.

RESULTS:

hUCMSCs differentiated into epidermal-like cells when cultured in conditioned medium as shown by positive immunofluorescence staining for CK19. Flow cytometry showed that the number of cells positive for CK19 in the epidermal stem cell-conditioned medium group was significantly higher than that of control group, but lower than that of the Wnt3a-conditioned group (p < 0.05). RT-PCR showed that the expression level of CK19 mRNA in the conditioned medium group was significantly lower than that of the Wnt3a group (p < 0.01). Westernblots showed that the expression of β-catenin in the conditioned medium group was significantly lower than that of the Wnt3a group (p < 0.01).

CONCLUSIONS:

These results suggest that Wnt3a can effectively promote the differentiation of hUCMSCs into epidermal-like cells.

PMID: 25635980
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان