تعیین ویژگی داربست های فاقد سلول شده مشتق از درم خوک با استفاده از یک روش غیر آنزیمی جدید برای کاربردهای زیست پزشکی

تاریخ انتشار: شنبه 22 فروردین 1394 | امتیاز: Article Rating

دردسترس بودن ساختارهای پوستی مهندسی بافت شده جدید که توسط ترکیبات مختلفی از معرف ها برای تولید یک ماتریکس بیولوژیکی بسیار حفظ شده طراحی شده اند، اغلب تنها راه برای کمک به بیماران مبتلا به آسیب های پوستی است. این مطالعه اثر پنج روش مختلف حذف سلول را بر روی داربست های پوستی خوک با توجه به ترکیب ماتریکس، قدرت بیومکانیکی، و سمیت سلولی با استفاده از تست زیست سازگاری در شرایط in vitro  ارزیابی کرده است. نتایج نشان داد که چهار روش از پنج پروتکل حذف سلول مورد آزمایش در تولید داربست های بدون سلول کارآمد بودند. با این وجود، روش حذف سلول با استفاده از شوک اسمزی بدون هضم آنزیمی نشان داد نه تنها در از بین بردن مواد و باقی مانده های سلولی از داربست پوستی بلکه در حفظ اجزای ماتریکس خارج سلولی (گلیکوزآمینوگلیکانها و کلاژن) مفید است. ارزیابی بافت شناسی نشان داد که معماری پوست شامل الیاف درشت کلاژن حفظ شدند. آزمایشات توسط میکروسکوپ الکترونی اسکنینگ و میکروسکوپ الکترونی گذاره نشان داد که ترتیب و فراساختار فیبرهای کلاژن در داربست ها به دنبال روش غیر آنزیمی حذف سلول و همچنین پس از ایجاد اتصالات عرضی بین کلاژن با استفاده از گنیپین حفظ شد. علاوه بر این، این داربست  فاقد سلول شده نه تنها هنگام هم کشتی با سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان و سلولهای فیبروبلاست از نظر بیولوژیکی سازگاری نشان دادند ، بلکه سلول ها را به انتشار عوامل تغذیه ای ضروری برای بازسازی بافت تحریک کردند.

 

J Biomater Appl. 2015 Apr 8. pii: 0885328215578638. [Epub ahead of print]

Characterisation of porcine dermis scaffolds decellularised using a novel non-enzymatic method for biomedical applications.

Greco KV1Francis L2Somasundaram M3Greco G2English NR4Roether JA5Boccaccini AR6Sibbons P2Ansari T2.

 

Abstract

Off-the-shelf availability of tissue-engineered skin constructs, tailored by different combinations of reagents to produce a highly preserved biological matrix is often the only means to help patients suffering skin damage. This study assessed the effect of five different decellularisation methods on porcine dermal scaffolds with regard to matrix composition, biomechanical strength, and cytotoxicity using an in vitro biocompatibility assay. Results demonstrated that four out of the five tested decellularisation protocols were efficient in producing acellular scaffolds. Nevertheless, decellularisation method using osmotic shock without enzymatic digestion showed to be efficient not only in removing cellular material and debris from dermal scaffolds but was also beneficial in the preservation of extracellular matrix components (glycosaminoglycans and collagen). Histological assessment revealed that the dermal architecture of coarse collagen bundles was preserved. Examinations by scanning electron microscopy and transmission electron microscopy showed that the arrangement and ultrastructure of collagen fibrils in the scaffolds were retained following non-enzymatic method of decellularisation and also after collagen crosslinking using genipin. Moreover, this decellularised scaffold was not only shown to be biologically compatible when co-cultured with bone marrow-derived mesenchymal stem cells and fibroblasts, but also stimulated the cells to release trophic factors essential for tissue regeneration.

PMID: 25855682
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان