اثرات پاراکرین سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان روی تکثیر، آپوپتوز و بیان آلفا اکتین 2 در سلول های اقماری کبدی

تاریخ انتشار: جمعه 25 فروردین 1396 | امتیاز: Article Rating

ما اثرات پاراکرین سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان(BMSCs) را روی تکثیر، آپوپتوز و بیان آلفا اکتین 2(ACTA2) سلول های اقماری کبدی(HSCs) بررسی کردیم و مکانیسم های احتمالی فاکتور رشد هپاتوسیتی(HGF) را کشف کردیم. ما یک سیستم هم کشتی را بوسیله کشت سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان روی لایه بالایی و سلول های اقماری کبدی روی لایه پایینی یک پلیت ترانس ول شش خانه ایجاد کردیم. سلول های اقماری کبدی طبیعی به تنهایی به عنوان کنترل کشت شدند. آپوپتوز سلولی بوسیله فلوسایتومتری تعیین شد. ما بیان mRNAی ACTA2 و پروتئین ACTA2 را در سلول های اقماری کبدی با استفاده از qRT-PCR و وسترن بلات تشخیص دادیم. بیان ACTA2 در سلول های اقماری کبدی بوسیله رنگ آمیز فلورسنس تشخیص داده شد و فاکتور رشد هپاتوسیتی در محیط رویی سیستم هم کشتی بوسیله ELISA تشخیص داده شد. نرخ آپوپتوز سلول های اقماری کبدی در گروه آزمایش 2.6 برابر گروه کنترل بود(P<0.05). سطح بیان mRNAی ACTA2 و پروتئین ACTA2 به طور معناداری در سلول های اقماری کبدی در مقایسه با گروه کنترل مهار شد(P<0.05). غلظت HGF در محیط رویی هم کشتی 0.43±0.47mM در گروه آزمایش بود که به طور معناداری از گروه کنترل بالاتر بود(0.16±0.43mM)(P<0.05). اثرات پاراکرین سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان که بوسیله سرکوب بیان ACTA2 و HGF اعمال شد، آپوپتوز سلول های اقماری کبدی را القا کرد.

Genet Mol Res. 2017 Mar 16;16(1). doi: 10.4238/gmr16019201.

Paracrine effect of bone marrow mesenchymal stem cells on proliferation, apoptosis, and alpha-actin-2 expression in hepatic stellate cells.

Cao HJ1, Wang MD2, Li SG1, Zhu L1, Zheng JH1.

Abstract

We investigated the paracrine effects of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) on the proliferation, apoptosis, and alpha-actin-2 (ACTA2) expression of hepatic stellate cells (HSCs), and explored the possible mechanisms of hepatocyte growth factor (HGF). We established a co-culture system by culturing BMSCs on the upper layer and HSCs on the lower layer of a 6-well Transwell plate. Normal HSCs were cultured alone as a control. Cell apoptosis was determined by flow cytometry. We detected the expression of ACTA2 mRNA and ACTA2 protein in HSC using quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) and western blotting, respectively. ACTA2 in HSCs was detected by fluorescent staining, and HGF in the co-culture supernatant was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The apoptotic rate of HSCs in the experiment group was 2.6 times that in the control group (P < 0.05). The expression levels of ACTA2 mRNA and ACTA2 protein were significantly inhibited in HSCs compared with the control group (P < 0.05). HGF concentration in the co-culture supernatant was 0.43 ± 0.47 mM in the experimental group, which was significantly higher than in the control group (0.16 ± 0.43 mM) (P < 0.05). The paracrine effect of BMSCs, which was caused by the suppression of ACTA2 and HGF expression, induced HSC apoptosis.

PMID: 28362976
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان