تولید نورون های گاباارژیک خالص بوسیله برنامه ریزی فاکتورهای رونویسی

تاریخ انتشار: شنبه 06 خرداد 1396 | امتیاز: Article Rating

 در حال حاضر رویکردها برای تمایز سلول های بنیادی پرتوان(PSCs) به نورون ها با دو چالش بزرگ مواجه است 1) سلول های تولید شده نابالغ بوده و ویژگی های عملکردی محدودی دارند و 2) کشت ها زیرنوع های نورونی و مراحل بلوغ ناهمگونی را نشان می دهند. پیش از این ما، با استفاده از فاکتورهای رونویسی تعیین کننده رده ای، یک روش تک مرحله ای را برای تولید نورون های گلوتاماترژیگ از سلول های بنیادی پرتوان ایجاد کردیم. در این جا، ما نشان می دهیم که بیان موقتی فاکتورهای رونویسی Asc11‌ و Dlx2(AD)  به طور منحصربفردی تولید نورون های گاباارژیک از سلول های بنیادی پرتوان انسانی را با درجه بالایی از بلوغ سیناپسی القا می کنند. این سلول های عصبی القا شده با AD یا iN cells به میزان زیادی با جمعیت های نورون های گاباارژیکی که مارکرهای متنوع خاص زیر نوع را بیان می کنند، هم پوشانی ندارند. ما بیشتر سلول های AD-iN را برای ایجاد کولیبیستین انسانی استفاده کردیم که یک از دست رفتن عملکرد ژنی است که منجر به انسفالوپاتی شدید می شود و برای مهار عملکرد سیناپسی ضروری است. تولید جمعیت های مشخص از نورون های گاباارژیک انسانی از نظر عملکرد بالغ یک گام مهم به سمت دست یافتن به توانایی مطالعه بیماری هایی است که انتقال های سیناپسی مهاری را تحت تاثیر قرار می دهند.

Nat Methods. 2017 May 15. doi: 10.1038/nmeth.4291. [Epub ahead of print]

Generation of pure GABAergic neurons by transcription factor programming.

Yang N1, Chanda S1,2, Marro S1, Ng YH1, Janas JA1, Haag D1, Ang CE1, Tang Y3, Flores Q3, Mall M1, Wapinski O4, Li M5, Ahlenius H1, Rubenstein JL6, Chang HY4, Buylla AA3, Südhof TC2, Wernig M1.

Abstract

Approaches to differentiating pluripotent stem cells (PSCs) into neurons currently face two major challenges-(i) generated cells are immature, with limited functional properties; and (ii) cultures exhibit heterogeneous neuronal subtypes and maturation stages. Using lineage-determining transcription factors, we previously developed a single-step method to generate glutamatergic neurons from human PSCs. Here, we show that transient expression of the transcription factors Ascl1 and Dlx2 (AD) induces the generation of exclusively GABAergic neurons from human PSCs with a high degree of synaptic maturation. These AD-induced neuronal (iN) cells represent largely nonoverlapping populations of GABAergic neurons that express various subtype-specific markers. We further used AD-iN cells to establish that human collybistin, the loss of gene function of which causes severe encephalopathy, is required for inhibitory synaptic function. The generation of defined populations of functionally mature human pluripotent stem cells represents an important step toward enabling the study of diseases affecting inhibitory synaptic transmission.

PMID: 28504679
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان