تشکیل ارگانوئیدهای روده ای در کشت قطرات معلق(hanging drop)

تاریخ انتشار: جمعه 20 بهمن 1396 | امتیاز: Article Rating

اخیرا ارگانوئیدها به طور گسترده ای در مدل های آزمایشگاهی بسیاری از بافت ها و اندام ها استفاده می شوند. این نوع ساختارها که از روده های جنینی یا بالغ پستانداران منشا گرفته اند، مینی روده(mini guts) نامیده می شوند. آن ها زمانی که کریپت های روده ای یا سلول های بنیادی را در داربست های تهیه شده از پروتئین های خارج سلولی(ماتری ژل) قالب گیری کردند، به طور خود بخود سازماندهی می شوند. این رویکرد دارای برخی از معایب است، از آن جایی که ترکیبات ماتری ژل ناشناخته است( غلظت های فاکتورهای رشد و سایر ترکیبات فعال زیستی موجود در آن ممکن است از ظرفی به ظرف دیگر متفاوت باشد)، کار کردن با آن راحت نیست و گران قیمت است. در این جا ما نشان دادیم که ارگانوئیدهای مشتق از روده جنین جوجه در قطرات معلق و بدون قالب گیری شکل می گیرند و جایگزین جذابی را برای پروتکل هایی که در حال حاضر استفاده می شوند ارائه می کنند. با استفاده از این تکنیک ما ساختارهای متراکمی را تولید کردیم که از ارگانوئیدهای پیوسته ترکیب شده اند و عموما از نظر مورفولوژی و بیان مارکرهای اپی تلیالی روده ای شبیه ارگانوئیدهای جوجه کشت شده در ماتری ژل هستند. به دلیل سادگی، تکرار پذیری بالا و ظرفیت بالای تکنیک قطرات معلق، مدل ما ممکن است در مطالعات مختلفی با محوری زیست شناسی روده(گوارش) بکار برده شود.

Cytotechnology. 2018 Jan 25. doi: 10.1007/s10616-018-0194-8. [Epub ahead of print]

The formation of intestinal organoids in a hanging drop culture.

Panek M1, Grabacka M1, Pierzchalska M2.

Abstract

Recently organoids have become widely used in vitro models of many tissue and organs. These type of structures, originated from embryonic or adult mammalian intestines, are called "mini guts". They organize spontaneously when intestinal crypts or stem cells are embedded in the extracellular matrix proteins preparation scaffold (Matrigel). This approach has some disadvantages, as Matrigel is undefined (the concentrations of growth factors and other biologically active components in it may vary from batch to batch), difficult to handle and expensive. Here we show that the organoids derived from chicken embryo intestine are formed in a hanging drop without embedding, providing an attractive alternative for currently used protocols. Using this technique we obtained compact structures composed of contiguous organoids, which were generally similar to chicken organoids cultured in Matrigel in terms of morphology and expression of intestinal epithelial markers. Due to the simplicity, high reproducibility and throughput capacity of hanging drop technique our model may be applied in various studies concerning the gut biology.

PMID: 29372467
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان