روش حفاظت انجمادی بدون سروم جنین گاوی برای ذخیره سازی بالینی سلول های بنیادی مشتق از چربی

تاریخ انتشار: جمعه 04 اسفند 1396 | امتیاز: Article Rating

استفاده از سروم جنین گاوی(FBS) به عنوان یک مکمل حفاظت انجمادی به دلیل خطر انتقال بیماری و هم چنین واکنش های ایمنی زنوژن در میزبان پیوند شده، برای ذخیره سازی سلول های بنیادی مزانشیمی(MSCs) مناسب نیستند. در این جا، ما بررسی کردیم که آیا آلبومین سروم انسانی(HSA)، سروم انسانی(HS) و یا جایگزین سرومی ناک اوت(KSR) می توانند FBS را برای حفاظت انجمادی سلول های بنیادی مزانشیمی جایگزین شوند یا خیر. علاوه براین، ما مشخصه های سلول های بنیادی مزانشیمی را بعد از چندین دور حفاظت انجمادی بررسی کردیم. سلول های بنیادی مشتق از چربی انسانی(ASCs) که با سه جایگزین FBS یعنی  9 درصد HSA، 90 درصد HS یا 90 درصد KSR در ترکیب با ده درصد دی متیل سولفوکساید(Me2SO) حفاظت انجمادی شدند، ویژگی های سلول های بنیادی شان شامل رشد، ایمنوفنوتیپ، الگوی بیان ژنی و پتانسیل تمایز به رده های چربی، غضروف و استخوان را مشابه با ASCهای فریز شده با FBS حفظ کردند. علاوه براین، ایمنوفنوتیپ، بیان ژ و قابلیت تمایزی ASCها تا چهار دور فریز و ذوب شدن تغییری نکرد. با این حال، انجام سه یا چهار دو فریز و ذوب، توانایی تکثیری ASCها را به میزان قابل توجهی کاهش داد که بوسیله افزایش زمان دو برابر شدن و فراوانی کاهش یافته واحد کلونی زایی نشان داده شد. در مجموع، نتایج ما نشان می دهد که HSA، HS یا KSR می توانند جایگزین FBS برای حفاظت انجمادی ASCها بدون تغییر ویژگی بنیادینگی شان باشند اما برای رویکردهای بالینی نباید برای بیش از دو دور فریز و ذوب از آن استفاده کرد.

Cryobiology. 2018 Feb 12. pii: S0011-2240(17)30288-2. doi: 10.1016/j.cryobiol.2018.02.008. [Epub ahead of print]

Fetal bovine serum-free cryopreservation methods for clinical banking of human adipose-derived stem cells.

Park S1, Lee DR2, Nam JS3, Ahn CW4, Kim H5.

Abstract

The use of fetal bovine serum (FBS) as a cryopreservation supplement is not suitable for the banking of mesenchymal stem cells (MSCs) due to the risk of transmission of disease as well as xenogeneic immune reactions in the transplanted host. Here, we investigated if human serum albumin (HSA), human serum (HS), or knockout serum replacement (KSR) can replace FBS for the cryopreservation of MSCs. In addition, we examined the characteristics of MSCs after multiple rounds of cryopreservation. Human adipose-derived stem cells (ASCs) cryopreserved with three FBS replacements, 9% HSA, 90% HS, or 90% KSR, in combination with 10% dimethyl sulfoxide (Me2SO) maintained stem cell properties including growth, immunophenotypes, gene expression patterns, and the potential to differentiate into adipogenic, osteogenic, and chondrogenic lineages, similar to ASCs frozen with FBS. Moreover, the immunophenotype, gene expression, and differentiation capabilities of ASCs were not altered by up to four freeze-thaw cycles. However, the performance of three or four freeze-thaw cycles significantly reduced the proliferation ability of ASCs, as indicated by the longer population doubling time and reduced colony-forming unit-fibroblast frequency. Together, our results suggest that HSA, HS, or KSR can replace FBS for the cryopreservation of ASCs, without altering their stemness, and should be processed with no more than two freeze-thaw cycles for clinical approaches.

PMID: 29448017
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان