مزیت های نسبی خون بندناف بعنوان منبع سلولی جهت درمان با سلول T تنظیمی اتولوگ در دیابت نوع 1
تاریخ انتشار: ﺳﻪشنبه 15 اردیبهشت 1394
| امتیاز:
خون بندناف بعنوان منبع سلولی جهت اهداف درمانی کودکان با دیابت نوع 1 و سایر بیماری ها می باشد. در اینجا، مزایای خون بندناف بعنوان منبع اتولوگ سلول های T تنظیمی جهت سلولی درمانی ایمنی در بیماران را بررسی کرده ایم. سلول های T تنظیمی CD4+ CD25+ خون بندناف و خون محیطی افراد سالم دهنده جدا شدند و در طی گسترش و بعد از آن در یک پروتکل 14 روزه با ترکیب anti-CD3/anti-CD28 و IL-2 با و بدون راپامایسین مقایسه شدند. سلول های T تنظیمی خون بندناف عمدتاً اولیه و دست نخورده بودند (7±89 در مقابل 10%±31 در بالغین جوان، p<0.0001) و نسبت به سلول های T تنظیمی بالغین (متوسط 516 برابر، p=0.001) و سلول های T تنظیمی اولیه و دست نخورده بالغین (متوسط 820 برابر، p=0.003) میزان گسترش بالاتری (متوسط 5968 برابر) داشتند. راپامایسین میزان گسترش را کاهش داد، اما جهت بدست آوردن سلول های خالص T تنظیمی خون بندناف گسترش یافته که با رنگ آمیزی توسط FOXP3 (3±94%)، وضعیت متیلاسیون FOXP3 (97%) و رنگ آمیزی سایتوکاین مؤثر داخل سلولی (6%) شناخته می شوند، ضروری نیست. سلول های T تنظیمی بالغ گسترش یافته در غیاب راپامایسین (FOXP3 19±72%؛ 76% توسط وضعیت متیلاسیون، INF- γ 13%>، IL-4 16%> و IL-17 5%> مثبت) خلوص کمتری دارند، اما خلوص با گنجاندن راپامایسین در طی گسترش بدست آمد. با وجود تفاوت در خلوص، تمام آماده سازی های سلول T تنظیمی گسترش یافته از تمام منابع توانایی قوی در سرکوب تکثیر سلول های T اجرایی در محیط آزمایشگاه را داشتند. نتایج پیشنهاد می کند که خون بندناف یک منبع عالی از سلول های T تنظیمی جهت گسترش و سلول درمانی اتولوگ می باشد که ممکن است بعنوان راه کاری جهت جلوگیری از تخریب با واسطه ایمنی سلول های بتا در دیابت نوع 1 در نظر گرفته شود.
Horm Metab Res. 2015 Jan;47(1):48-55. doi: 10.1055/s-0034-1394372. Epub 2014 Nov 5.
The relative merits of cord blood as a cell source for autologous T regulatory cell therapy in type 1 diabetes.
Abstract
Cord blood has been used as a cell source for therapeutic purposes in children with type 1 diabetes and other disorders. Here, we explore the benefits of cord blood as an autologous source of T regulatory cells for immune cell therapy in patients. CD4(+)CD25(+) T regulatory cells were isolated from cord blood and adult peripheral blood of healthy donors and compared during and after expansion in a 14-day protocol incorporating anti-CD3/anti-CD28 beads, and IL-2 with or without rapamycin. Cord blood T regulatory cells were largely naïve (89±7 vs. 31±10% in young adults, p<0.0001), and had higher expansion yields (median 5,968-fold) than adult T regulatory cells (median 516-fold, p=0.001) and adult naïve T regulatory cells (median 820-fold, p=0.003). Rapamycin reduced expansion yields, but was not necessary to obtain pure expanded cord blood T regulatory cells as judged by FOXP3 staining (94±3%), methylation status of FOXP3 (97%), and intracellular effector cytokine staining (< 6%). Expanded adult T regulatory cells were much less pure in the absence of rapamycin (72±19% FOXP3; 76% by methylation status, <13% INF-γ, <16% IL-4, <5% IL-17 positive), but purity was achieved by inclusion of rapamycin during expansion. Despite differences in purity, all preparations of expanded T regulatory from all sources were able to strongly suppress proliferation of T effector cells in vitro. Our findings suggest that cord blood is an excellent source of T regulatory cells for expansion and autologous cell therapy that may be considered as a strategy to prevent immune-mediated destruction of beta cells in type 1 diabetes.
PMID: 25372776