تکثیر سلول های بنیادی/پیش ساز خون ساز خون بند ناف در نانوداربست سه بعدی پوشیده شده با فیبرونکتین

تاریخ انتشار: یکشنبه 24 مرداد 1395 | امتیاز: Article Rating

زمینه:

پیوند سلول های بنیادی خون ساز آلوژن در درمان بیمارانی که از اختلالات خونی و غیر خونی رنج می برند استفاده می شود اما کاربرد آن به دلیل شناسایی یک اهدا کننده مناسب محدود است. خون بند ناف(UCB) یک منبع جایگزین پیوند سلول های بنیادی خون ساز(HSC) است. برخلاف همه مزیت ها، دوز سلولی محدود یکی از مشکلات اصلی است. تکثیر Ex-vivo سلول های بنیادی خون ساز راه حلی جایگزین برای فائق آمدن بر این مشکل است.

مواد و روش ها:

در این مطالعه، داربست پلی کاپرولاکتون(PCL) با فیبرونکتین پوشیده شده(3 بعدی) با سیستم کشت سلولی معمولی(دوبعدی) برای استفاده از کشت سلولی مقایسه شد. ده هزار سلول های CD34+‌خون بند ناف بوسیله MACS جداسازی شده، روی داربست PCL کشت داد شده و برای ده روز به آن ها اجازه تکثیر داده شد. قبل و بعد از این دوره، مجموع سلول ها، سلول های CD34+، ارزیابیCFC‌و بیان CXCR4 ارزیابی شد.

نتایج:

یافته های ما نشان داد که داربست سه بعدی  بیان 58 برابری سلول کل را در مقایسه با محیط دو بعدی(بیان 38 برابری) نشان داد. هم چنین سلول های CD34+ در سه بعدی در مقایسه با کشت سلولی دو بعدی 40 برابر افزایش نشان داد. این تفاوت از نظر آماری معنادار بود(p<0.05). علاوه براین،تعداد کل کلونی ها در داربست سه بعد در مقایسه با سیستم کشت سلولی دو بعدی بالاتر بود اما از نظر آماری تفاوت معناداری مشاهده نشد. بیان بالاتر CXCR4 در سه بعدی در مقایسه با دو بعدی خانه گزینی بهتر سلول هایی که در دو بعدی کشت داده شده بودند را نشان داد(p<0.05).

بحث:

داربست PCL پوشیده شده با فیبرونکتین شمار بالاتری سلول های کلی و سلول های CD34+ را در مقایسه با سیستم کشت دو بعدی معمولی داشت. یافت ها نشان داد که سه بعدی در مقایسه با دو بعدی سیستم کشت سلولی مناسبی برای تکثیر سلول های بنیادی خون ساز است.

Int J Hematol Oncol Stem Cell Res. 2015 Apr 1;9(2):72-9.

Expansion of human cord blood hematopoietic stem/progenitor cells in three-dimensional Nanoscaffold coated with Fibronectin.

Mousavi SH1, Abroun S2, Soleimani M2, Mowla SJ3.

Abstract

BACKGROUND:

Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation is used in the treatment of patients suffering from hematologic and non-hematologic disorders, but the application is limited by the identification of a suitable donor. Umbilical cord blood (UCB) is an alternative source of hematopoietic stem cell (HSC) transplantation. Despite all advantages, the limited cell dose is one of the  major obstacles. Ex-vivo expansion of HSC is an alternative way to overcome this problem.

MATERIALS AND METHODS:

In this study, polycaprolactone (PCL) scaffold coated with fibronectin (3D) is compared to routine cell culture system (two dimensional, 2D) used for cell culture.1×10(4) cord blood CD34+ cells isolated by MACS were seeded on PCL scaffold and allowed to expand for 10  days. Before and after this period, total cells, CD34(+) cells, CFC assay and CXCR4 expression were evaluated.

RESULTS:

Our findings demonstrated that 3D scaffold produced a 58-fold expansion of total cells compared to 2D cultures (38-fold expansion). Also CD34+ cells in 3D compare to 2D cell culture was 40-fold and 2.66 fold increased, respectively; this difference was statistically significant (p<0.05). Moreover, total number of colonies in the 3D scaffold was higher than those of 2D cell culture system, but no statistically significant difference was observed. Higher expression of CXCR4 in 3D compared to 2D showed better homing of cells that were cultured in 3D scaffold (p<0.05).

CONCLUSION:

PCL scaffold coated with fibronectin had higher number of total cells and CD34+cells than 2D routine culture system. Findings revealed that 3D is a proper cell culture system for hematopoietic stem cell expansion, compared to 2D.

PMID: 25922647
ثبت امتیاز
نظرات
در حال حاضر هیچ نظری ثبت نشده است. شما می توانید اولین نفری باشید که نظر می دهید.
ارسال نظر جدید

تصویر امنیتی
کد امنیتی را وارد نمایید:

آرشیو سالانه
آرشیو سالانه
نظرات خوانندگان
نظرات خوانندگان